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當前位置:首頁技術文章Fina Biosolutions 載體蛋白一級代理

Fina Biosolutions 載體蛋白一級代理

更新時間:2020-06-17點擊次數:1305

Fina Biosolutions,LLC公司由Andrew Lees博士創立于2006年,起初公司致力于幫助疫苗制造商生產結合疫苗。隨后FinaBio公司提供各種生物結合和蛋白制備服務。Fina Biosolutions公司分子生物學檢測團隊研發出了用于生產載體蛋白的大腸桿菌菌株,用于載體蛋白的生產,CRM197和rTTHc蛋白已用于臨床前研究。此外,Fina Biosolutions專注于多糖標記的功能化葡聚糖和相關產品的生產,產品包括:氨基和羧基右旋糖酐,熒光右旋糖酐單功能和多功能右旋糖酐等。

特色產品:CRM197 載體蛋白

CRM 優于KLH 作為載體蛋白 ,使用 Fina Biosolutions 的 CRM,EcoCRM 改善免疫應答和療效。鑰孔血藍蛋白 (Keyhole limpet hemocyanin,KLH) 因其*的免疫原性和易于獲得而常被用作載體蛋白。然而,由于其多絲起源和較差的表征,天然 KLH 不是理想的載體。相比之下,遺傳解毒的白喉毒素 CRM 是 58.4 kDa 的重組蛋白,也具有高度免疫原性。通過 MALDI-TOF 質譜可以很容易地表征藥物和肽 CRM 偶聯物。我們的研究表明,用 Fina Biosolutions 的 CRM,EcoCRM 制成的結合物的免疫原性等于或優于 KLH 的結合物。197 作為一種極大的外源蛋白,KLH 誘導自身和與其連接的分子產生*的抗體滴度。

然而,KLH 是從海蝸牛的血液中獲得的,使得規模擴大和臨床使用具有挑戰性。它是一種混亂的、有點不明確的聚合蛋白,這使得很難對其進行表征。此外,KLH 在低鹽和中性 pH 溶液中的溶解度較差,KLH 結合物的質量控制存在問題。目前尚無使用 KLH 作為載體蛋白的許可疫苗。相反,CRM 是一種基因解毒的白喉毒素,在細菌中重組產生,為 58.4 kDa 的定義明確的蛋白。CRM 用于多種許可疫苗,包括 Prevnar。Fina Biosolutions 開發了一種*的大腸桿菌菌株,其以高產率將 CRM 表達為一種可溶性、適當折疊的細胞內蛋白。該蛋白以大腸桿菌 CRM 的商品名“EcoCRM”上市。EcoCRM 可用于研究和臨床。我們一致發現 EcoCRM 偶聯物誘導的抗體應答等于或大于 KLH 偶聯物。此外,與 KLH 不同,CRM 結合物可通過 SDS PAGE 和質譜進行表征。®197 我們的研究表明,用 EcoCRM(Fina Bio 的 CRM)制備的結合物的免疫原性與用 KLH 制備的結合物相當。

A. MALDI-TOF 法表征載體蛋白和結合物。與半抗原偶聯前 (A1) 和偶聯后 (A2) 分析 EcoCRM® 載體蛋白。使用在高質量線性模式下操作的 Applied Biosystems/MDS SCIEX 54800 MALDI TOF/TOF 分析儀分析樣品。

B. 抗體半抗原 IgG 反應。在第 0、14 和 28 天,用 1 mg 明礬佐劑配制的 100µg 未結合 KLH(對照)、Hapten-KLH 或 Hapten-EcoCRM s.c. 免疫 BALB/c 小鼠(n≥4 只/組)。ELISA 法測定抗半抗原滴度。

肽 PepL1 與 FinaBio 的即用型結合物 CRM-馬來酰亞胺或 KLH(由肽合成公司)結合。即用型結合物 CRM-馬來酰亞胺極大地促進了 EcoCRM 結合物的合成。如圖所示,與 KLH 結合物相比,CRM 結合物產生了*的抗肽抗體應答。小鼠在接種疫苗后產生免疫反應,并用靶向伯克霍爾德菌表面 OMP 的肽-蛋白 +/-佐劑增強免疫反應。AddaVax 佐劑 (~MF59)。FinaBio 的 Ready-to-conjugate CRM 對結合物的響應顯著高于 KLH。還應注意,即使不存在佐劑,CRM 結合物也具有免疫原性。

 

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規格

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